分析辣根过氧化物酶（HRP）示踪方法结果时有哪些问题需要注意？

（1）有效注射范围：HRP的注射范围从注射中心向周围扩散，浓度递减。其注射区的有效范围是难以确定的问题，故影响对结果的分析。一般认为注射中心深染而不能辩明其结构的区域为有效区，而其周围可辨标记细胞的区域则为无效区。
（2）过路纤维问题：路经注射区的纤维也可摄取HRP并被顺、逆向运送。因此，标记部位所出现的神经元或终末，可能并非起于或终止于注射部位。这是在分析结果时经常遇到的问题。
（3）侧支标记：HRP标记被一轴突末梢摄入后，在其被逆向运送过程中，有一些可以沿该轴突的侧支被顺向运至侧支的末梢，在侧支的末梢部造成终末标记。因此，在一个部位发现终末标记，并不一定说明发出这些纤维的胞体位于注射区内。
（4）跨突触标记：HRP被运至末梢后，可能被释放出来，并被下一级神经元摄入，甚至再运送至下一级神经元的末梢。这种现象不多见，主要见于用较灵敏的WGA- HRP作追踪剂时，而且是在第一级末梢密集，并与第二级神经元的关系密切的情况下出现。例如，视网膜节细胞末梢内的HRP可能跨突触地标记外侧膝状体神经元。