条件性基因敲除的时间特异性是怎么实现的？

诱导型 Cre-loxP 系统介导了时间特异性基因敲除，通过对给予诱导剂的时间的控制，人为操控基因敲除的发生。
（1）四环素诱导型 tetO-Cre
    将四环素调控系统与Cre-loxP系统相结合，一般需要两种转基因小鼠交配使用，即 Cre 工具鼠和rtTA或 tTA小鼠。
    在此过程中，具有转录激活功能的rtTA或者tTA与tetO结合后激活Cre的表达。同时，这种结合受四环素或四环素衍生物强力霉素（Dox）的调节，因此在 tetO-Cre 与组织特异性 rtTA （或 tTA ）双转基因阳性小鼠中，可以通过给予或撤离 Dox 来控制 Cre 重组酶在特定组织中产生的时间。
（2）干扰素诱导型 Mx1-Cre
    干扰素诱导是通过 Mx1 基因启动子对于干扰素的响应来实现的。此方法仅限于响应干扰素的细胞，且其基因敲除效率依赖于组织或细胞对干扰素的响应水平或干扰素响应细胞的数量。
（3）雌激素诱导型 Cre-ER
    将雌激素受体（ER）的配体结合区与 Cre 重组酶相融合，形成定位于胞浆中的融合蛋白（Cre-ER）。这样就通过控制雌激素的注射时间，可以实现对基因重组时间特异性的调控。为了避免内源雌激素的干扰，在人ER的配体结合区进行一个点突变（G521R），使 Cre-ER 只响应外源的人工合成雌激素（比如：Tamoxifen、4-OHT）的诱导。