小布Tips|外周—中枢神经环路标记整体服务

时间:2021-09-24 14:01

解析神经网络结构及连接图谱是揭秘大脑如何调控复杂活动机制的基本前提。嗜神经病毒的跨突触追踪技术可实现外周与中枢的神经环路标记,为各类疾病作用机制的研究提供了强有力的实验支撑。

 

这篇文章,小布带您以实例入手,了解各类外周器官至中枢神经环路标记。

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Kate L Montgomery, Sci Transl Med, 2016


 

下面,小布就以一些嗜神经病毒在外周不同部位的注射及中枢标记结果为实例,列举我们常见的环路标记技术。

 

 

肌肉——中枢(神经系统相关疾病)

使用病毒:PRV-EGFP、HSV-tdTomato

注射位点:脚下核(EP), 咬肌

实验动物:自残行为(SIB)大鼠模型

实验方法与结果:将逆行PRV-EGFP注入咬肌48h后,与EP处注射逆行HSV-tdTomato,以示踪EP -咬肌途径,研究其与SIB的作用机理。感染60小时后,在PVN、LHb处观察到EGFP和tdTomato共同表达。表明LHb-VTA途径参与调节SIB。

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 (Yujie Guo, J Neurosci, 2018)


心脏——中枢(心血管疾病)

使用病毒:PRV-CAG-EGFP

注射位点:心脏

实验动物:雄性SD大鼠

实验方法与结果:在大鼠心室心肌的顶端注射PRV-CAG-EGFP,表达5天后,与心肌、SCG、PVN和SCN区域均观察到PRV标记的神经元。表明心脏接受来自SCN多突触神经输入,昼夜节律主起搏器SCN与心脏之间存在解剖联系,即SCN-PVN-SCG-心脏的交感神经轴。

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(Yuhong Wang, Front Cardiovasc Med, 2021 )

 

肝脏——中枢(代谢相关研究)

使用病毒:PRV-GFP

注射位点:肝脏

实验动物:C57Bl6小鼠

实验方法与结果:将PRV-GFP注射至小鼠肝左叶后, 表达不同时间时(3-8d),发现五个感染阶段的代表性区域,I期,脊髓中GFP表达;II期,包括脑干背侧运动10N、PVH和下丘脑旁核(PSTh)中GFP表达;III期,包括NTS、LH和腹侧被盖区(VTA)中GFP表达;IV期,包括后区(AP)、A5区和杏仁核中央核(Ce)中GFP表达;V期,皮层M1区出现GFP免疫荧光。表明了PRV-GFP注射入肝脏后主要感染部位。

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(Sarah Stanley, Proc Natl Acad Sci USA, 2010)


 

胰腺——中枢(糖尿病)

使用病毒:PRV-BaBlu

注射位点:胰腺

实验动物:MIP-CreERT小鼠

实验方法与结果:与小鼠胰腺中注射PRV-BaBlu,注射96h后,β-Gal在PVN、ARC、VMN、DMN、CeA和LHA脑区中进一步富集,脑区可能与胰腺交流相关。大脑其他部位和胰腺附近组织中均未检测到β-Gal。

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(Wilfredo Rosario, Diabetes, 2016)

 

膀胱——中枢(膀胱过度活跃综合症)

使用病毒:PRV-EGFP、PRV-RFP

注射位点:膀胱壁

实验动物:C57BL/6小鼠

实验方法与结果:将PRV-EGFP注射到小鼠膀胱壁后,在皮层S1/M1L5锥体神经元观察到EGFP信号。分别将PRV-EGFP与PRV-RFP注射到小鼠右侧和左侧膀胱壁,在皮层S1/M1L5锥体神经元观察到EGFP和RFP共同表达。表明PRV-EGFP、PRV-RFP无差别逆行跨多级到皮层S1/M1L5锥体神经元,皮层S1/M1L5锥体神经元为支配膀胱壁的上游脑神经元群。

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(Jiwei Yao, Nat Neurosci, 2018)

 

性腺——中枢(性相关疾病)

使用病毒:PRV

注射位点:睾丸

实验动物:雄性SD大鼠

实验方法与结果:与睾丸处注射PRV,5天后在前脑区CeA、PVN处均观察到其免疫荧光,同时检测PRV标记的细胞中CRF/TH阳性和阴性的细胞占比,为进一步研究脑—睾丸通路调节机制。

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(P James, J Neuroendocrinol, 2008)

 

脾脏——中枢(免疫方向研究)

使用病毒:PRV-CMV-mRFP 或PRV-CMV-GFP

注射位点:脾脏

实验动物:B6小鼠

实验方法与结果:通过脾脏注射表达荧光蛋白的重组伪狂犬病病毒(PRV) 进行逆行追踪,注射96小时之后,从脾脏至脊髓、脑干和下丘脑均检测到荧光信号。表明脾脏处接受来自中枢神经系统 PSth、SubC、NTS、VLM、 LPGi区域的跨多级神经元输入。
 

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(Xu Zhang, Nature, 2020)



耳蜗——中枢(听觉方向研究)

使用病毒:PRV-EGFP

注射位点:耳蜗

实验动物:豚鼠

实验方法与结果:耳蜗注射PRV后,在上橄榄复合体中发现标记神经元。在橄榄外侧上叶(LSO)中发现PRV标记的小尺寸神经元,其边缘有少量较大尺寸的神经元,这些神经元被归为LOC神经元;在梯形体的腹侧核(VNTB)中也发现PRV标记的MOC神经元。表明PRV标记并识别耳蜗神经元的输入信号。

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(M Christian Brown, J Assoc Res Otolaryngol, 2013)



以上是小布总结的外周--中枢环路相关实例。

更多外周注射部位及中枢标记,可联系小布咨询哦。


 

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时间:2021-09-24 14:01来源:未知 作者:admin8 点击: