VSV简介
水疱性口炎病毒（VSV）属于弹状病毒科（
Rhabdoviridae） 水疱病毒属（
Vesiculovirus），是有囊膜的非分段单股负链RNA 病毒。其VSV要感染啮齿类动物、鱼类、牛、猪、马、禽类及非人灵长类等，在人群中的流行率极低，仅有个别动物饲养员和实验室人员的感染案例，感染后症状轻微或无症状。
VSV侵入宿主后，病毒糖蛋白G介导病毒粒子与细胞表面受体结合，通过内吞作用进入细胞。随后通过pH介导膜融合，促使VSV基因组释放到细胞质中。感染病毒粒子内包装的L、N、P共同构成的聚合酶复合物以基因组负链RNA为模板启动转录表达，复制，组装，出芽产生子代病毒。
干扰素简介
干扰素（Interferon，IFN）是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的具有多种功能的活性蛋白（主要是糖蛋白），其具有高活性、多功能的特点。IFN是一种广谱抗病毒剂，具有抑制病毒复制、影响细胞生长以分化、调节免疫功能等多种生物活性。
按照IFN结构与功能不同，可将其主要分为：Ⅰ型（IFN-α、IFN-β、IFN-ε、IFN-ι、IFN-ω、IFN-δ和IFN-ξ）、Ⅱ型（IFN-γ）和Ⅲ型（IFN-λ）。
干扰素生物活性检测
在基础、临床研究和研发中，常使用VSV介导的细胞病变抑制法检测IFN生物学活性。相较于报告基因法等只能测定某种类型IFN，干扰素生物活性检测可检测全部类型的IFN，应用范围更广。
本法系依据干扰素可以保护人羊膜细胞（WISH）免受VSV破坏的作用，用结晶紫对存活的WISH细胞染色，在波长570nm处测定其吸光度，可得到干扰素对WISH细胞的保护效应曲线，以此测定干扰素生物学活性。
测定方法：
（1）WISH细胞在培养基中贴壁生长。按(1:2)~(1:4)传代，每周2~3 次，于完全培养液中生长。
（2）取培养的细胞弃去培养液，用PBS洗2次后消化和收集细胞，用完全培养液配制成每1mL含2.5×10
5~3.5×10
5个细胞的细胞悬液，接种于96孔细胞培养板中，每孔100μL，于37℃、5%二氧化碳条件下培养4~6小时。
（3）将配制完成的标准品溶液和供试品溶液移人接种WISH细胞的培养板中，每孔加入100μL，于37℃、5%二氧化碳条件下培养18~24小时。
（4）弃去细胞培养板中的上清液，将保存的VSV用攻毒培养液稀释至约100CCID
50，每孔100μL，于37℃、5%二氧化碳条件下培养24小时（镜检标准品溶液的50%病变点在1IU/mL）。
（5）弃去细胞培养板中的上清液，每孔加入染色液50μL，室温放置30分钟后，用流水小心冲去染色液，并吸干残留水分，每孔加入脱色液100μL，室温放置3~5分钟。
（6）混匀后，用酶标仪以630nm为参比波长，在波长570nm处测定吸光度，记录测定结果。
（7）试验数据采用计算机程序或四参数回归计算法进行处理，并按下式计算结果：
式中 Pr为标准品生物学活性，IU/ml；
Ds为供试品预稀释倍数；
Dr为标准品预稀释倍数；
Es为供试品相当于标准品半效量的稀释倍数；
Er为标准品半效量的稀释倍数。
注：显色方法也可采用经等效验证的其他显色方法。
