时间:2023-02-07 21:05
随着PRV病毒在中枢神经环路和外周器官中枢调控网络研究领域的广泛应用,香港宝典免费资料网在PRV生产和使用等方面积累了丰富经验。目前PRV在中枢神经系统环路示踪研究中的使用趋于成熟,但是在外周脏器的中枢调控网络解析中,一直存在示踪效果不佳的情况,例如示踪结果不稳定、荧光信号弱,标记效率低等。
详见往期推文:小布tips | 外周——中枢神经环路标记整体服务
下面,小布就以我们公司PRV在中枢标记及外周不同部位的注射测试结果为实例,分享一些PRV使用tips。
PRV在小鼠中枢及外周使用对比
PRV在小鼠中枢及外周的示踪测试效果图
1、中枢网络示踪
产品:BC-PRV-724;
剂量:100 nl;
表达时间:3天。
2、某内脏器官的神经调控网络示踪
产品:BC-PRV-531-Plus;
剂量:3 ul;
表达时间:4-5天。
3、某腺体的神经调控网络示踪
产品:BC-PRV-531-Pro;
剂量:3 ul;
表达时间:4-5天。
Notes:
1. 由于PRV病毒对动物机体有一定的毒性作用,建议选择成年且健康状况良好的动物开展实验,以便更高效地完成相关示踪研究。
2. 注射PRV病毒之后,大约3-5天左右小鼠会出现相应的症状,应定期监测小鼠状态,当出现蜷缩不动、抽搐、颤抖等症状时可进行灌流取材,濒死状态取材时PRV感染效果最佳。
3. 注射PRV病毒之后,小鼠出现症状的时间窗不易掌控,建议从注射后第3天增加监测小鼠的频率;
4. PRV为逆向跨多突触病毒,动物实验时,可根据环路连接级数设定不同的取材时间。根据病毒生活周期推测其在中枢内的传播速度可能为24-36h,跨一级突触;36-48h跨两级突触;60-72h跨三级突触或更多,所以应根据实验需求合理安排取样时间。
5 活体实验中,若因表达时间较短等原因造成荧光信号较弱的情况,可通过免疫组化实验放大荧光信号。
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参考文献
1. Pickard G E,Smeraski C A,Tomlinson CC,Banfield B W,Kaufman J,Wilcox C L,Enquist
L W,Sollars P J.J.Neurosci.,2002,22: 2701-2710
2. Banfield B W,Kaufman J D,Randall J A,Pickard G E.J.Virol.,2003,77: 10106-10112
3. Jia F,Lv P,Miao H,Shi X,Mei H,Li L,Xu X,Tao S,Xu F.Front.Neuroanat.,2019,13: 63
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