雄性			雌性
体重（g）	日龄（天）		体重	日龄（天）
<12	<23		<12	<23
13-15	24-28		13-15	24-31
16-18	29-35		16-18	32-52
19-21	36-45		19-21	53-77
22-24	45-63		22-24	78-105

（1）腹腔麻醉
    把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷，腹腔注射，3分钟麻醉，30分钟清醒。
（2）吸入麻醉
    将大鼠封入密封缸中，注入液态吸入麻醉药。
（3）经口气管插管
    腹腔麻醉，四肢仰面固定，上下切牙用丝线系住作牵引，操作者头戴额镜，对面放置好光源，牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住，上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定，拉动丝线使头部上提和口充分张开，右手持18G或16G套管针，看到声门既可插管。

（1）小鼠需要固定好，头和躯体要保持一条直线，并且灌胃时使小鼠成竖直位，头向上；
（2）灌胃剂量可选0.1 mL/10 g或0.2 mL/10 g，根据实际情况决定，防止小鼠灌胃后俯卧喘息；
（3）操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约3 cm；
（4）从小鼠的嘴角进针，进去后让灌胃针顺着小鼠的上腭压住它的舌头进入食道，当中有突破感，突破感过后和灌液体时无明显阻力；
（5）成年小鼠每次最大可灌1.0 mL。

1日龄鼠仔裸体鲜红，3日龄耳壳露出表皮，4日龄期待疤痕脱落，5日龄能翻身，8日龄能爬行，10日龄能听见声音，9-11日龄全身被白毛且长出门齿，13-15日龄眼皮张开、能跳跃和抓取东西，18日龄后能自行采食和独立生活。

（1）注射前可用50 ℃左右热水浸泡小鼠尾部约1 min左右，见尾静脉明显充盈起来即可；
（2）拉平拉紧尾部，使得尾部静脉处于一个平面上；若无法完成，可用手托起或踮起部分尾部使尾静脉伸展；
（3）注射前用酒精涂抹尾部，使尾静脉完全暴露；
（4）注射时要斜面向上，选择平行与尾静脉的方向刺入，不要有任何角度，刺入约0.5-1 cm后退针但不要完全退出，斜面退出约一半时如果针在血管里会有血冒出，然后再次进针，进针距离要短于第一次进针距离，否则会刺穿血管。然后推注液体，此时应该不会感到有很大阻力，可以看到尾静脉血管变白，但是周围组织没有肿，此时顺利完成尾静脉注射；
（5）不推荐根据推注压力感觉是否进入血管，因为这样会浪费一部分细胞，导致计数不准。

跨多级的VSV注射滴度为10⁹ IFU/mL，不 跨突触VSV-ΔG 注射滴度为10⁷ IFU/mL。在大小鼠标记试验中，病毒注射体积根据实验方法（需求、滴度、表达量）的不同也存在差异，推荐的注射体积中枢注射一般为50-300 nL，外周注射一般为1-3 μL。

10⁸ IFU/mL。推荐的注射体积为混合后的总体积100-300 nL，注射速度为20-50 nL/min。若目标核团较小或Cre在该区域的外周围也有较多表达，为控制起始感染区域的特异性，可适当降低注射AAV病毒的体积及速度；反之，如需标记大范围或Cre只在局部区域高特异性表达，可增加AAV注射的体积与速度。

为保证RV-EnvA-ΔG-DsRed注射时已有高丰度表达的TVA介导其感染神经元及G蛋白补偿其跨突触能力，AAV注射后需表达两周或三周， 然后在同一区域注射RV-EnvA-ΔGdsRed；RV注射后一般以10天为标准时间牺牲动物，而此时间也可控制在7-12天（所有实验样本都需保证采用一致的时间窗口）。

大脑中枢注射VSV后，对动物具有较强毒性， 感染VSV后存活时间一般为3-4天（中枢注射），动物体质不同，存活时间也有差异。外周注射存活时间延长2~4天。因此，病毒注射后，可根据环路连接级数多少在不同时间点取样。在中枢，跨突触数目经验值为：跨1~2级，24~36小时；跨2~3级， 30~ 48小时； 需经常查看动物状态，以免动物提前死亡，影响正常取样。